在血清或血浆中测得的总碱性磷酸酶(ALP)活性是各种组织来源的多种不同类型ALP的总和。目前,已知人体组织中的ALP同工酶由4种基因编码。它们是:
?肾脏,肝脏和骨骼中发现的组织非特异基因:该基因编码的3种同工酶异构体、肾脏-ALP、骨一ALP和肝脏-ALP,仅在翻译后获得的碳水化合物支链方面不同。
?胎盘基因:编码胎盘同工酶。
?肠基因:编码小肠同工酶。
?生殖细胞基因:编码睾丸、胸腺、肺部的同工酶。
在常规条件下,在淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶上或乙酸纤维素条带上通过电泳可以将血清中的ALP同工酶分离,该方法可以区分以下同工酶:
?肝脏ALP。
?骨ALP。
?胎盘ALP。
?肠ALP。
?肝脏ALP的多种异构体,如胆汁淤积时产生的高分子量ALP和ALP脂蛋白-X复合物。通过等电聚焦电泳可以区分17种以上的异构体。
适应症1、总ALP增加的疾病:
肝胆疾病的诊断和监测,如:梗阻性*疸、胆汁性肝硬变、肝细胞性疾病、原发性肝肿瘤、肝转移瘤。
骨病的诊断和监测:
?原发性骨病:如变形性骨炎、佝偻病、骨软化症成骨不全、多骨性纤维性发育不良维生素D中*症、原发性骨瘤。
?继发性骨病:如骨转移瘤、多发性骨髓瘤、甲状旁腺功能亢进、肢端肥大症、甲状腺功能亢进症、肾功能不全骨折愈合、异位性骨化、结节病、骨结核。
2、总ALP减少的疾病:
?家族性磷酸酶过少症。
?透析患者的骨缺失性疾病。
?甲状腺功能低下。
?软骨发育不良。
?垂体性侏儒。
?慢性放射线疾病。
?营养不良。
ALP同工酶:
对许多临床上的问题来说,测定ALP已足够提供资料。在某些总ALP增加的情况下,测定其同工酶可以鉴别组织或器官对该酶升高的反应性。
在下列情况时,需要对骨病患者进行骨ALP定量分析:
?患者合并肝脏疾病。
?必须监测疾病发展过程。这与单一活性的测定和与参考值范围相比,是一种更好的鉴别方法。
临床意义ALP活性水平增高
在健康人群的血清或血浆中测得的总ALP几乎全部来自肝脏和骨骼系统。大约25%的健康人也产生肠ALP,占禁食样本总ALP的10%。总ALP增加可以是生理性的,也可以由肝脏和(或)骨骼疾病引起。
生理性总ALP升高见于:
?妊娠期间,从妊娠第4个月开始(胎盘ALP)。
?发育中的儿童(骨ALP)。
?餐后的O型及B型血个体,Lewis阳性,是血型物质H的分泌者(肠ALP)。
病理性总ALP升高,是由于:
?肝胆疾病和急性胰腺炎。
?原发性和继发性骨疾病。
?由肿瘤组织赘生的碱性磷酸酶。
总碱性磷酸酶减少是罕见的,唯一与临床相关的原因是家族性磷酸酶过少症。
ALP的多种形式
对其ALP活性增高或仍在总ALP参考值范围内的患者,测定ALP的多种形式,如:ALP同工酶和异构体,可提供如下的信息(表1.2-2)。
?组织损害程度,如肝胆疾病引起的损害。
?代谢活性,诸如骨软化症、佝偻病、绝经后骨质疏松所致骨骼系统的代谢紊乱。
?恶性组织的生长,如基于某种基因过度表达所引起的ALP同工酶增加。
ALP同工酶测定方法1、ELISA测定酶活性:若肝ALP升高2倍,交叉反应性为3%~8%,若肝ALP更加增高时则交叉反应性约20%。
2、免疫计测定法:在总ALP水平升高达参考值上限两倍时,该法可特异性地测定骨ALP。在更高水平时,由于肝脏同工酶的影响,非特异性反应增高。
3、热灭活和化学抑制:可定量测定ALP同工酶但测定的要求很精确。
4、麦芽凝集沉淀骨ALP测定法:如血清未经三硝基甲苯X-(tritonX-)预处理,则也可沉淀部分胆管ALP。
5、未处理血清电泳:由于电泳条带之间有重叠,故该法仅能定性评价骨和肝ALP的升高。该方法不适于在太长的聚丙烯酰胺凝胶上分离。
6、含麦芽凝集素的凝胶电泳分离法:该方法测定骨和肝ALP的精确性和准确性同沉淀法。骨ALP含量高时,在阳极的方向骨ALP条带出现污点现象。
7、神经氨酸酶处理后血清的电泳分离:该方法的缺点是在琼脂糖凝胶上分离时骨ALP和胆管ALP可能有重叠。另外,也可出现不能归属于已知同工酶的电泳条带。
8、骨ALP:如在高活性肝ALP旁边可检测到骨ALP,则免疫测定法和ELISA两种方法均不如电泳分离效果好。
《临床试验诊断学》
编辑:Rose审校:小芒果
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