胆源性胰腺炎

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TUhjnbcbe - 2021/12/9 19:29:00

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目的探讨糖原合酶激酶3β(GSK3β)在轻型/重症急性胰腺炎发病中的表达及作用方法采用单独雨蛙素、雨蛙素联合脂多糖刺激分别构建轻型急性胰腺炎(MAP)和重症急性胰腺炎(SAP)的细胞模型,分别在2、4、8、12、24h收集细胞培养基上清,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测淀粉酶、脂肪酶、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的表达变化,流式细胞术检测细胞凋亡率及坏死率,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测GSK3β及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、-8、-9mRNA表达变化。结果雨蛙素组和雨蛙素+脂多糖组各时间点淀粉酶、脂肪酶、TNF-α、IL-6较对照组均增高,且在大多数时间点,雨蛙素+脂多糖组组比雨蛙素组水平更高,开始上调时间相同或更早(Plt;0.05)。刺激24h后,雨蛙素组凋亡率[(19.2±0.9)%]显著高于雨蛙素+脂多糖组[(10.2±0.5)%,Plt;0.05]。雨蛙素组坏死率[(5.8±0.3)%]显著低于雨蛙素+脂多糖组[(13.6±0.7)%,Plt;0.05]。SAP组的坏死/凋亡比值是MAP组的5倍。GSK3β的mRNA水平在雨蛙素组中是2h短暂下调[相对表达量为(0.5±0.1)倍]后于8h显著上升[相对表达量为(3.0±1.1)倍,Plt;0.05],然后又逐步下降;而在雨蛙素+脂多糖组中则是是8h才缓慢上调[相对表达量为(1.8±0.6)倍,Plt;0.05],至24h达到高峰[相对表达量为(3.6±0.3)倍,Plt;0.05]。GSK3β和Caspase-3mRNA水平均有升高,但差异无统计学意义(Pgt;0.05)。结论采用单独雨蛙素、雨蛙素联合脂多糖刺激分别建立MAP和SAP细胞模型可行;GSK3β在MAP和SAP中可能通过促进腺泡细胞凋亡来起作用。

目的观察氢饱和生理盐水(HRS)对于急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肝脏活性氧自由基(ROS)激活的丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)通路的影响,并探讨其对于ANP大鼠肝脏的保护作用。方法90只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(SO)组、ANP组和HRS组,每组分为3、12、24h3个亚组(n=10)。逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠制备ANP模型,SO组仅开腹翻动胰十二指肠后关腹。HRS组术后尾静脉补充HRS6ml/kg,同时皮下注射HRS20ml/kg,其余各组同等剂量给予生理盐水。术后分组剖杀,检测血清血淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LIP)、谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)。取胰头及肝组织固定切片,观察病理改变并评分或分级,免疫组织化学检测肝脏组织中磷酸化c-jun氨基端激酶(p-JNK)、p-p38及磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)表达。检测新鲜肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平。结果各时间点ANP大鼠血清AMY(U/L)(±比±)、LIP(U/L)(.9±.4比86.5±8.9)、ALT(U/L)(.9±15.8比56.1±5.4)、AST(U/L)(.5±53.0比.6±14.7)以及胰腺肝脏病理评分[(13.79±1.36)比(0.38±0.53)分]较SO组均显著升高,差异有统计学意义(Plt;0.05);HRS组AMY(U/L)(±比±)、LIP(U/L)(.8±.3比.9±.4)较ANP组下降,但差异无统计学意义(Pgt;0.05)。HRS组ALT(U/L)(.8±11.8比.9±15.8)、AST(U/L)(.6±20.5比.5±53.0)及肝脏的病理分级(17.1比23.1)较ANP组有显著降低,差异有统计学意义(Plt;0.05);ANP组肝脏组织SOD(U/mg)(.2±11.6比.4±33.2)活性水平较SO组有明显降低,MDA(nmol/mg)(12.6±3.1比3.9±1.7)水平明显升高,差异有统计学意义(Plt;0.05),HRS组肝脏组织中SOD(U/mg)(.4±12.5比.2±11.6)活性较ANP组有显著升高,MDA(nmol/mg)(9.7±2.3比12.6±3.1)含量显著降低,差异有统计学意义(Plt;0.05)。ANP组肝脏组织中p-JNK(.40±10.70比2.60±0.45),p-p38(63.1±6.9比16.2±1.7),p-ERK(7.10±1.40比0.90±0.04)水平比较于SO组明显升高,差异有统计学意义(Plt;0.05),HRS组p-JNK(51.30±9.70比.40±10.70)及p-p38(16.2±1.7比63.1±7.0)水平比较于ANP组有显著下降,差异有统计学意义(Plt;0.05),但p-ERK(6.70±1.30比7.10±1.40)表达差异无统计学意义(Pgt;0.05)。结论HRS可有有效的降低ANP大鼠肝脏氧化应激,从而减少ROS对JNK及p38通路的激活,从而对ANP大鼠肝脏起到保护作用。

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